成人精品一区二区久久久 I 手机免费看av网站 I 青青青青久久精品国产 I 日产国产精品亚洲系列 I 久久中文精品视频 I 无码va在线观看 I 噜噜噜久久,亚洲精品国产品 I 日本边添边摸边做边爱小视频 I 777色婷婷 I 国产免费黄色网址 I 成年18网站免费进入夜色 I 欧美小视频在线 I 天堂a2022v乱码 I 综合一区在线观看 I 性色av网站 I 777色狠狠一区二区三区 I 午夜剧场午夜剧场 I 日日摸夜夜骑 I 成在人线av无码免费高潮求绕 I 97人人模人人爽人人喊38tv I 夜夜爽夜夜叫夜夜高潮 I 搡老熟女国产 I 亚洲一区二区久久久 I 成人小黄书 I 日韩欧美中字 I 色噜噜亚洲精品中文字幕 I 特一级黄色录像 I 看真人视频a级毛片 I 极度另类bbwbbwbbw日本 I 中文无码一区二区不卡αv

本試劑盒只能用于科學研究，不得用于醫學診斷

人（Human）軟骨糖蛋白39（HCgp-39）

ELISA檢測試劑盒

使用說明書

檢測原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被軟骨糖蛋白39（HCgp-39）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的軟骨糖蛋白39（HCgp-39）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

樣品收集、處理及保存方法

1.  血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。

3.  細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。

5.  保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

自備物品

• 酶標儀（450nm）
• 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
• 37℃恒溫箱

操作注意事項

1.   試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正常現象，水浴加熱使結晶*溶解后再使用。
2.   實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。
3.   濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時樣本已經稀釋5倍，終結果乘以5才是樣本實際濃度。
4.   嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5.   所有液體組分使用前充分搖勻。

試劑盒組成

注：標準品（S0-S5）濃度依次為：0、5、10、20、40、80 ng/mL

試劑的準備

 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

洗板方法

1.   手工洗板：甩盡孔內液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。
2.   自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

操作步驟

1.   從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.   設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.   樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。 
4.   除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.   棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.   每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.   每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。

結果判斷

 繪制標準曲線：在Excel工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應OD值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。

試劑盒性能

•  準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值，大于等于0.9900。
•  靈敏度：DI檢測濃度小于1.0 ng/mL。
•  特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
•  重復性：板內、板間變異系數均小于15%。
•  貯藏：2-8℃，避光防潮保存。
•  有效期：6個月

?

實驗代做服務：